畜牧与饲料科学 ›› 2014, Vol. 35 ›› Issue (12): 1-1.doi: 10.12160/j.issn.1672-5190.2014.12.003
刘娜 李春秋 高晶 耿雨菲 王欣宇 苏明俊 魏姗 王志慧 王建发 武瑞 孙东波
LIU Na,LI Chun-qiu,GAO Jing,GENG Yu-fei,WANG Xin-yu,SU Ming-jun,WEI Shan,WANG Zhi-hui,WANG Jian-fa,WU Rui,SUN Dong-bo(College of Animal Science and Technology, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China)
摘要: [目的]利用大肠杆菌原核表达系统对猪干扰素α-1(PoIFNα-1)基因进行表达,制备PoIFNα-1重组蛋白多克隆抗体。[方法]根据GenBank发表的PoIFNα-1核苷酸序列,合成密码子优化的PoIFNα-1基因,构建PoIFNα-1基因的pET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌后,利用IPTG进行诱导表达。表达的PoIFNα-1重组蛋白纯化后,免疫昆明系小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot技术检测PoIFNα-1重组蛋白的多克隆抗体与天然PoIFNα-1的反应性。[结果]合成的PoIFNα-1基因在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中成功表达,针对PoIFNα-1重组蛋白的多克隆抗体能够识别天然的猪干扰素α-1。[结论]合成的PoIFNα-1基因在大肠杆菌中获得了成功表达,为后续研究奠定了基础。
中图分类号: