畜牧与饲料科学 ›› 2014, Vol. 35 ›› Issue (10): 9-9.doi: 10.12160/j.issn.1672-5190.2014.10.005

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EMA与PCR结合检测大肠杆菌O157方法的研究

高延玲 狄元冉 李金磊 董鹏 班付国 张发旺   

  1. 河南省兽药饲料监察所,河南郑州450002
  • 出版日期:2014-10-20 发布日期:2014-10-20
  • 通讯作者: 高延玲
  • 作者简介:高延玲(1980-),女,高级兽医师,博士,主要研究方向为畜产品质量安全检测。 通讯作者:班付国(1964-),男,研究员,硕士,主要研究方向为畜产品质量安全检测。

  • Online:2014-10-20 Published:2014-10-20

摘要: 为了建立1种快速检测样品中大肠杆菌O157并能区分死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR结合,以O157特有的抗原基因rfbE为靶基因,以O157的纯培养物为模板扩增,进行灵敏度、特异性、曝光时间及最佳EMA浓度筛选实验。结果显示:该检测方法的灵敏度为1.2×102 CFU/mL,最佳曝光时间为1 min。终浓度≥1μg/mL的EMA,能有效抑制O157死菌的扩增,而当EMA终浓度≤16μg/mL时对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制作用。 EMA-PCR能有效减少O157活菌检测过程中假阳性结果的出现。

中图分类号: