畜牧与饲料科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (4): 21-21.doi: 10.12160/j.issn.1672-5190.2007.04.016
H5N1亚型AIVNS1基因在大肠杆菌中的表达
刘畅[1,2] 焦培荣[2] 刘威龙[2] 侯勇跃[3] 陈化兰[2]
- [1]内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特010018 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、农业部动物流感重点开放实验室、兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [3]内蒙古农牧业科学院动物医学研究所,内蒙古呼和浩特010030
摘要： 根据巳测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列，设计并合成一对特异性引物NS1U／NS1L，利用RT—PCR方法扩增出该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a（书）上，通过酶切分析及序列测定，鉴定出了NS1,基因片段的阶浊重组子。转化BL21大肠杆菌感受态细胞后。经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。成功表达出大小约45．0kD的NS1融合蛋白，表达产物主要存在于包涵体中。用Weslern-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别。
中图分类号: