畜牧与饲料科学 ›› 2019, Vol. 40 ›› Issue (2): 12-15.doi: 10.12160/j.issn.1672-5190.2019.02.004
杨斌[1];朝洛门[2];陈志鹏[2];苏日娜[2];张月梅[1];宋越[1];萨娜[2];萨日盖[2];萨茹丽[2];赵世华[1]
YANG Bin[1];Chaoluomen[2];CHEN Zhi-peng[2];Surina[2];ZHANG Yue-mei[1];SONG Yue[1];Sana[2];Sarigai[2];Saruli[2];ZHAO Shi-hua[1]
摘要: 为建立能同时检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的双重PCR诊断方法,该研究根据GenBank 中登录的MG gapA基因序列和MS heat shock ATP-dependent protease基因序列,设计2对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了能够同时检测MG和MS的双重PCR诊断方法。特异性检测结果显示,该方法能够扩增出729 bp的MG和309 bp的MS特异性片段,对禽巴氏杆菌、大肠杆菌、鸡白痢沙门菌、副鸡禽杆菌核酸扩增均为阴性;敏感性检测结果显示,对MG和MS DNA的最低检出量均为5×10^-2 ng/μL;临床样品的检测结果显示,所建立的双重PCR方法可同时有效地检测出MG、MS混合感染和单独感染。该研究建立的鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为快速、高效检测MG和MS提供了技术支持。
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