摘要： [目的]建立羊源肠球菌属与屎肠球菌的双重PCR检测方法,对临床分离的菌株进行快速检测。[方法 ]设计肠球菌属特异性和屎肠球菌种特异性引物,建立双重PCR反应体系;评价双重PCR反应的特异性和敏感性;利用混合菌液制备模拟感染样品,确定双重PCR反应对模拟感染样品检测的特异性和敏感性。[结果]建立的双重PCR反应能够特异性的扩增肠球菌属(294 bp)和屎肠球菌(557 bp)DNA片段;该方法对常见的动物源细菌无交叉反应,对肠球菌属的最低检测量为5.71×10-5 ng/μL,对屎肠球菌的最低检测量为5.71×10-4ng/μL;双重PCR反应能够特异性的检测模拟感染样品中的肠球菌属和屎肠球菌,对于模拟感染样品中的屎肠球菌检测量为1×101CFU/m L。[结论]建立的双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,为快速鉴定屎肠球菌提供了快速、准确的方法。

中图分类号: 

• S852.61