1株羊源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定、药敏试验及致病性研究

doi:10.12160/j.issn.1672-5190.2022.05.020

畜牧与饲料科学 ›› 2022, Vol. 43 ›› Issue (5): 123-128.doi: 10.12160/j.issn.1672-5190.2022.05.020

• 动物疾病防控 • 上一篇

1株羊源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定、药敏试验及致病性研究

宋越¹,王娜¹,张帆¹,张月梅¹,戴伶俐¹,白帆¹,李晓艳²,格根宝乐日²,刘双翼²,王根云²,赵世华¹

1.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古呼和浩特 010031
2.呼和浩特市动物疫病防控中心，内蒙古呼和浩特 010020

收稿日期:2022-04-26 出版日期:2022-09-30 发布日期:2022-09-21
通讯作者: 赵世华（1962—），男，研究员，主要研究方向为动物传染病防控。王根云（1962—），男，高级兽医师，主要研究方向为动物疫病防控。
作者简介:宋越（1990—），女，助理研究员，博士，主要从事动物传染病研究工作。
基金资助:
内蒙古自治区科技计划项目(2020GG0041);呼和浩特市科技计划项目(2019-农-10);内蒙古自治区农牧业创新基金项目(2020CXJJM06);内蒙古自治区农牧业创新基金项目(2019CXJJM10);内蒙古自治区农牧业创新基金项目(2018CXJJM05)

Isolation，Identification，Antimicrobial Susceptibility Test and Pathogenicity of a Mannheimia haemolytica Strain from Goat

SONG Yue¹,WANG Na¹,ZHANG Fan¹,ZHANG Yue-mei¹,DAI Ling-li¹,BAI Fan¹,LI Xiao-yan²,Gegenbaoleri ²,LIU Shuang-yi²,WANG Gen-yun²,ZHAO Shi-hua¹

1. Inner Mongolia Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences，Hohhot 010031，China
2. Hohhot Municipal Prevention and Control Center for Animal Epidemic Disease，Hohhot 010020，China

Received:2022-04-26 Online:2022-09-30 Published:2022-09-21

摘要/Abstract

摘要：

[目的]对某养殖场由呼吸道症状引发的山羊死亡病例进行病原学诊断，并对分离到的病原进行药敏试验及致病性分析。[方法]无菌条件下剖检并采集死亡羊只肺脏及气管组织，接种于TSA固体培养基，37 ℃培养22~24 h；挑取疑似菌落，纯化后进行革兰染色镜检和生化鉴定；对经表型鉴定的分离菌株进行16S rDNA PCR扩增、测序，并进行遗传进化树构建和同源性分析；采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行药敏试验；利用动物攻毒试验确定分离菌株对羔羊的致病性。[结果]从临床样本中分离到1株细菌，命名为DMQ-Y-Mh。纯化后的分离菌株镜检为革兰阴性短杆菌，经生化鉴定以及16S rDNA PCR扩增、测序、同源性分析，将分离菌株鉴定为溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）。分离菌株对环丙沙星、阿奇霉素、庆大霉素敏感，对左氧氟沙星、土霉素、氟苯尼考中度敏感，对替米考星、恩诺沙星、泰乐菌素耐药。攻毒羔羊于72 h内死亡，剖检眼观气管及肺脏支气管内有黏性分泌物；肺脏组织有深红色病灶，与正常肺脏组织界限明显，可再次从死亡羔羊肺脏及气管组织分离到溶血性曼氏杆菌。[结论]溶血性曼氏杆菌是造成该养殖场发生羊只死亡的病原菌，药敏试验结果为指导临床用药提供了参考。

关键词: 山羊, 溶血性曼氏杆菌, 分离鉴定, 药敏试验, 致病性

Abstract:

[Objective] A goat death case caused by respiratory symptoms in a farm was etiologically diagnosed, and the antimicrobial susceptibility and pathogenicity of the isolated bacterial pathogen were characterized. [Method] The dead goat was dissected and the lung and trachea tissues were collected in sterile conditions. The clinical samples were incubated on TSA solid medium and cultured at 37 ℃ for 22-24 h. After purification, the suspected bacterial colonies were subjected to Gram staining, microscopic examination and biochemical identification. The phenotypically identified strain was molecularly comfirmed by 16S rDNA PCR amplification, sequencing, phylogenetic tree construction and homology analysis. The antimicrobial susceptibility test of the isolate was performed with broth micro-dilution method. The pathogenicity of the isolate to goat kid was determined by using an animal challenge test. [Result] A bacterial strain designated as DMQ-Y-Mh was isolated from the clinical samples. The isolate was observed as Gram-negative bacilli under microscope, and was identified as Mannheimia haemolytica following biochemical identification as well as 16S rDNA PCR amplification, sequencing and homology analysis. It was sensitive to ciprofloxacin, azithromycin and gentamicin, moderately sensitive to levofloxacin, oxytetracycline and florfenicol, and resistant to tilmicosin, enrofloxacin and tylosin. Within 72 h of the challenge with the isolate, the goat kid perished, and the trachea and lung bronchi contained viscous secretions. There were dark red lesions in the lung tissue, and the boundary with the normal lung tissues was obvious. Mannheimia haemolytica could be isolated from the lung and trachea tissues of the dead goat kid again. [Conclusion] Mannheimia haemolytica was the pathogenic agent that caused the death of goat in the farm. The results of the antimicrobial susceptibility test served as a guide for clinical medication.

Key words: goat, Mannheimia haemolytica, isolation and identification, antimicrobial susceptibility test, pathogenicity

中图分类号:

S858.275.1

宋越, 王娜, 张帆, 张月梅, 戴伶俐, 白帆, 李晓艳, 格根宝乐日, 刘双翼, 王根云, 赵世华. 1株羊源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定、药敏试验及致病性研究[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(5): 123-128.

SONG Yue, WANG Na, ZHANG Fan, ZHANG Yue-mei, DAI Ling-li, BAI Fan, LI Xiao-yan, Gegenbaoleri , LIU Shuang-yi, WANG Gen-yun, ZHAO Shi-hua. Isolation，Identification，Antimicrobial Susceptibility Test and Pathogenicity of a Mannheimia haemolytica Strain from Goat[J]. Animal Husbandry and Feed Science, 2022, 43(5): 123-128.

图/表 8

图1

图2

表1

图3

图4

图5

表2

图6

参考文献 18

[1]	韩小丽. 致肉牛运输热溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及某些生物学特性研究[D]. 石河子: 石河子大学, 2019.
[2]	金鹰. 牛溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其药物敏感性分析[D]. 呼和浩特: 内蒙古农业大学, 2019.
[3]	SCHAFFER A P, LARSON R L, CERNICCHIARO N, et al. The association between calfhood bovine respiratory disease complex and subsequent departure from the herd,milk production,and reproduction in dairy cattle[J]. Journal of the American Veterinary Medical Association, 2016, 248(10):1157-1164. doi: 10.2460/javma.248.10.1157
[4]	陈艳红, 颜忠, 查振林, 等. 溶血性曼氏杆菌致病机理的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2010, 37(12):153-155.
[5]	李垚. 绵羊源血清型1型及2型溶血性曼氏杆菌重要免疫原的分子特性及免疫原性研究[D]. 成都: 西南民族大学, 2020.
[6]	吴越. 羊呼吸道主要细菌性病原的三重荧光定量PCR方法的建立与应用[D]. 成都: 西南民族大学, 2021.
[7]	李雪霞, 李富祥, 赵文华, 等. 云南羊溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 上海畜牧兽医通讯, 2014(1):36-38.
[8]	李娟, 刘阳, 彭欠欠, 等. 羊溶血性曼氏杆菌的分离与鉴定[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2013(20):96-97.
[9]	AHMED W, MOHAMMED R J, KHALAF I. Molecular and phenotypical characterization of Mannheimia haemolytica isolated from goats in Baghdad Province[J]. Advances in Microbiology, 2017, 7(4):135-147.
[10]	王晨骁, 王斌, 冯航, 等. 羊溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 动物医学进展, 2022, 43(2):90-94.
[11]	林裕胜, 江锦秀, 张靖鹏, 等. 福建山羊溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 福建农业学报, 2019, 34(3):326-330.
[12]	郜敏, 杨有文, 杨发龙. 绵羊源溶血性曼氏杆菌的分离、鉴定及其生物学特性分析[J]. 中国兽医学报, 2021, 41(8):1525-1531.
[13]	马弘财, 张丽鸿, 元振杰, 等. 那曲市1株牦牛源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2021(6):76-79.
[14]	江金欢, 张丽鸿, 汪亚苹, 等. 西藏绵羊溶血性曼氏杆菌分离鉴定及药敏特性研究[J]. 中国草食动物科学, 2019, 39(1):47-51,58.
[15]	张升杨, 李前勇, 张德志, 等. 肉牛溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 西南大学学报(自然科学版), 2017, 39(1):21-24.
[16]	王羽, 董文龙, 汪艳, 等. 绵羊溶血性曼氏杆菌的分离鉴定[J]. 中国兽医科学, 2016, 46(7):870-873.
[17]	谢倩茹, 姜鹏, 彭清洁, 等. 牛溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌A型、B型的比较鉴定研究[J]. 中国奶牛, 2015(14):48-54.
[18]	KATSUDA K, KOHMOTO M, MIKAMI O, et al. Plasmid-mediated florfenicol resistance in Mannheimia haemolytica isolated from cattle[J]. Veterinary Microbiology, 2012, 155(2/4):444-447. doi: 10.1016/j.vetmic.2011.09.033

1株羊源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定、药敏试验及致病性研究

Isolation，Identification，Antimicrobial Susceptibility Test and Pathogenicity of a Mannheimia haemolytica Strain from Goat

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表 8

参考文献 18

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	陈俊凯, 于月通, 杨彬, 王泽坤, 李静, 陀海欣, 徐俊飞, 齐萌. 新疆维吾尔自治区阿拉尔市某规模化养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其毒力、耐药性分析[J]. 畜牧与饲料科学, 2024, 45(1): 114-119.
[2]	石玉节,柴贝贝,张彦昕. 鸭源奇异变形杆菌和摩氏摩根菌的分离鉴定、NDM耐药基因检测及中药体外抑菌试验[J]. 畜牧与饲料科学, 2023, 44(5): 121-128.
[3]	斯钦孟和, 李胜利, 孙海洲, 张春华, 张乐, 张彦宁, 白雨. 加强“大数据+”科技服务，助推绒山羊产业高质量发展——以内蒙古鄂尔多斯市为例[J]. 畜牧与饲料科学, 2023, 44(4): 1-9.
[4]	郑伟, 康连和, 刘鹏斌, 特日格勒, 李子健, 李星云, 王莉梅, 张园园, 刘秀丽, 史培, 乔健敏. 内蒙古锡林郭勒盟酸乳清中酵母菌的分离鉴定[J]. 畜牧与饲料科学, 2023, 44(3): 103-108.
[5]	任鹏跃, 桑丹, 张春华, 阿树瓦尼, 塔娜, 陶格特其, 斯钦孟和. 内蒙古鄂尔多斯市绒山羊产业发展现状及效益分析——基于鄂托克旗入户调查数据[J]. 畜牧与饲料科学, 2023, 44(1): 7-16.
[6]	陈玲, 杨竞贤, 成温玉, 宋渊博, 王月曦, 贺志芹, 周月亭, 楚渠, 彭云武, 陈正余, 刘强. 日粮中添加富硒桑叶粉对陕南白山羊屠宰性状和肌肉脂肪酸的影响[J]. 畜牧与饲料科学, 2023, 44(1): 54-59.
[7]	姚逸安, 孙仁修, 姜俊芳, 管峰. 黄淮山羊产羔数与胎次的关联性分析[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(6): 68-71.
[8]	熊菊萍, 肖滢宇, 张诚, 韩青松, 高小龙, 李增魁, 文英, 仝丽娜. 1株鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(5): 106-111.
[9]	王娜, 张帆, 宋越, 白帆, 戴伶俐, 张月梅, 李晓燕, 周渊, 王建光, 王根云, 赵世华. 奶山羊羔羊山羊痘的病理学、血清学及分子生物学诊断[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(4): 116-121.
[10]	苏少锋, 孟子琪, 王超, 赵俊利, 郝宸昉, 赵启南. 基于线粒体DNA D-loop区序列分析中国及新西兰奶山羊遗传进化关系[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(3): 64-72.
[11]	刘晓齐, 郭军, 刘雨佳, 高玎玲. 内蒙古4种家畜乳硒含量测定及评价[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(1): 98-103.
[12]	王娜, 戴伶俐, 乌云塔娜, 毕力格, 赵世华, 达来宝力格. 犊牛源雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定及药物敏感性试验[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(1): 119-123.
[13]	贾梓渤, 彭健康, 朱燕, 陈海峰, 王婧. 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 畜牧与饲料科学, 2022, 43(1): 124-128.
[14]	王娜, 戴伶俐, 乌云塔娜, 钢托亚, 赵世华, 达来宝力格. 内蒙古锡林郭勒盟犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性试验[J]. 畜牧与饲料科学, 2021, 42(6): 106-111.
[15]	乌力吉, 成海荣, 哈斯牧仁, 李春生, 何托雅, 崔红霞, 何云梅, 郭清亮, 王泽平, 张军锋, 乌兰其其格, 李荣. 内蒙古阿尔巴斯白绒山羊羔羊短期育肥效果与屠宰性能分析[J]. 畜牧与饲料科学, 2021, 42(3): 21-27.