基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究

doi:10.12190/j.issn.2096-1197.2023.01.04

北方农业学报 ›› 2023, Vol. 51 ›› Issue (1): 31-37.doi: 10.12190/j.issn.2096-1197.2023.01.04

基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究

韩平安^1,2, 常悦^1,2, 唐宽刚^1,2, 李晓东^1,2, 王力伟^1,2, 梁亚晖^1,2, 杨静^1,2, 石海波^1,2, 吴新荣^1,2

1.内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古呼和浩特 010031;
2.内蒙古自治区甜菜品种遗传改良与种质创制重点实验室,内蒙古呼和浩特 010031

收稿日期:2023-01-03 出版日期:2023-02-20 发布日期:2023-05-22
通讯作者: 石海波（1976—）,女,副研究员,博士,主要从事作物生物技术的研究工作。吴新荣（1967—）,男,研究员,博士,主要从事作物生物技术的研究工作。
作者简介:韩平安（1987—）,女,副研究员,博士,主要从事作物生物技术的研究工作。
基金资助:
内蒙古农牧业创新基金项目（2022CXJJN09,2018CXJJN07）; 内蒙古自治区“草原英才”创新人才团队项目; 2018 年度自治区本级引进第五类人才科研支持和岗位激励项目

Study on agrobacterium mediated transfer of CP4-EPSPS gene into maize inbred line B73

HAN Ping′an^1,2, CHANG Yue^1,2, TANG Kuan′gang^1,2, LI Xiaodong^1,2, WANG Liwei^1,2, LIANG Yahui^1,2, YANG Jing^1,2, SHI Haibo^1,2, WU Xinrong^1,2

1. Inner Mongolia Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences,Hohhot 010031,China;
2. Inner Mongolia Key Laboratory of Sugarbeet Genetics and Germplasm Enhancement,Hohhot 010031,China

Received:2023-01-03 Online:2023-02-20 Published:2023-05-22

摘要/Abstract

摘要： 【目的】建立玉米遗传转化体系培育抗除草剂玉米材料,解决玉米杂草危害问题。【方法】采用农杆菌介导法在玉米自交系B73幼胚中转入抗除草剂基因（CP4-EPSPS）,通过PCR、qRT-PCR鉴定转基因植株;利用ddPCR技术筛选低拷贝转基因植株,并对低拷贝植株进行草铵膦抗性鉴定。【结果】在所获得的181株抗性植株中12株为阳性,转基因植株的外源抗除草剂基因（CP4-EPSPS）在转录水平上均能正常表达;转基因植株中筛选到低拷贝植株5株;抗性鉴定证明转基因植株均具有草铵膦抗性。收获T₁代转基因低拷贝植株种子5份。【结论】建立了以B73为受体,基于农杆菌法介导的玉米遗传转化体系。

关键词: 玉米, 农杆菌介导法, 抗草甘膦基因（CP4-EPSPS）, 遗传转化

Abstract: 【Objective】Establish a maize genetic transformation system to cultivate maize lines with herbicide tolerance and address the issue of weed damage in maize.【Methods】Herbicide tolerance gene（CP4-EPSPS）was transformed into immature embryos of maize inbred line B73 by agrobacterium mediated transformation. The transgenic plants were identified by PCR and qRT-PCR. Low copy transgenic events were screened by ddPCR,followed by phosphinothricin tolerance test.【Results】12 of the 181 acquired tolerance lines tested positive. The exogenous herbicide tolerance gene（CP4-EPSPS）of the transgenic plants expressed normally at the transcriptional level. Five low copy lines were selected from the transgenic plants. All the transgenic plants were phosphinothricin tolerant in the tolerance test. T₁ seeds from the 5 transgenic low copy lines were harvested.【Conclusion】Established a maize genetic transformation system mediated by Agrobacterium transformation using B73.

Key words: Maize, Agrobacterium mediate transformation, Glyphosate resistance gene（CP4-EPSPS）, Genetic transformation

中图分类号:

S513.032

韩平安, 常悦, 唐宽刚, 李晓东, 王力伟, 梁亚晖, 杨静, 石海波, 吴新荣. 基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究[J]. 北方农业学报, 2023, 51(1): 31-37.

HAN Ping′an, CHANG Yue, TANG Kuan′gang, LI Xiaodong, WANG Liwei, LIANG Yahui, YANG Jing, SHI Haibo, WU Xinrong. Study on agrobacterium mediated transfer of CP4-EPSPS gene into maize inbred line B73[J]. Journal of Northern Agriculture, 2023, 51(1): 31-37.

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基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究

Study on agrobacterium mediated transfer of CP4-EPSPS gene into maize inbred line B73

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